一文读懂慢病毒(LV)| 什么是慢病毒?慢病毒载体的应用!
揭示慢病毒(LV)的奥秘:基因载体的革新应用
慢病毒(LVs),一种经过巧妙改造的HIV-1基因载体,因其卓越的感染能力和基因表达效率,已成为科研领域的明星。LVs的独特之处在于它们能稳定感染分裂和非分裂细胞,且通过删除大部分HIV基因,显著降低免疫原性,从而在神经科学、基因治疗和药物研究等领域发挥重要作用。
LVs的应用实例亮点纷呈,如利用hM3D-Gq在PV阳性的中间神经元中实现精细定位,通过LVhEF1α-DIO-hM3D-GqmCherry的注射,科学家们在小鼠海马区观察到了显著的神经元标记和活动调控(Zou et al., Curr Mol Med, 2016)。LV-dCas9/sgRNA则在哺乳动物基因组成像中展现出了强大的能力(Baohui Chen et al., Cell, 2013)。在治疗SCID-X1患者中,SIN-LV成功改善了免疫功能(De Ravin et al., Sci Transl Med, 2016)。LV-CRISPR/Cas9更是实现了对HIV-1感染的高效清除(Rafal Kaminski et al., Sci Rep, 2016),而LV-CRISPRa/i则在调控基因转录方面展现出广阔前景(Luke A. Gilbert et al., Cell, 2014)。
慢病毒系统的构建工艺精密严谨,由表达载体、包装载体和胞膜载体构成,通过293细胞的高效转染,确保了生物安全性。例如,枢密科技的LV载体基于三代系统设计,包括转移载体和辅助质粒,为实验提供了可靠的安全保障。
在深入研究中,LVs的应用不断扩展。例如,Parr-Brownlie等人在2015年的Frontiers in Mol Neurosci中探讨了LVs在神经系统生物学中的影响(2015: 14)。De Juan-Sanz等人在《神经元》杂志上揭示了轴突内钙离子对释放的调控机制(2017)。通过LVs,科学家们还能捕捉社会恐惧电路(Sakurai et al., Neuron, 2016)和揭示电耦合在大脑皮层中的作用(Yao et al., Nat Commun, 2016)。
LVs在神经科学研究中的应用不断突破,如Zou等人探讨了DREADD在齿状核中的作用(Curr Mol Med, 2016),而Chen等人的研究则优化了CRISPR/Cas系统(Cell, 2013)。De Ravin等人的工作展示了造血干细胞基因疗法的潜力(Sci Transl Med, 2016),而Kaminski等人的研究则实现了HIV-1的CRISPR/Cas9消除(Sci Rep, 2016)。
总的来说,LVs作为基因疗法的高效工具,其在神经科学、基因编辑和药物研究中的应用展现了强大的潜力,继续引领着科研前沿的发展。随着研究的深入,LVs将为我们揭示更多关于生命机制和疾病治疗的新见解。
什么是慢病毒、腺病毒及腺相关病毒,他们在科研领域的主要应用和特点分别...
慢病毒:① 可以稳定整合至宿主基因组,整合位点随机;② 可以对分裂期及非分裂期细胞进行感染;③ 包装片段至多8 kb,浓缩滴度至多为108-109TU\/mL,片段越大,滴度越低;④ 可以应用Tet-on等诱导表达系统,表达水平较高;腺病毒:① 不能整合至宿主基因组,仅能瞬时表达;② 可以对分裂期...
知识分享 | 慢病毒包装介绍及技巧分享
慢病毒(Lentivirus,LV)是逆转录病毒科中的一种球形包膜病毒,直径约为80-120nm。其基因组由两个拷贝的单股正链RNA组成,包含逆转录酶、整合酶、蛋白酶等酶促蛋白核衣壳,以及包裹它们的基质蛋白和包膜蛋白。包膜蛋白与靶细胞受体结合并介导病毒进入细胞。基因组两端的长末端重复序列(LTR)允许慢病毒...
常用慢病毒载体系统及包装注意事项
一、慢病毒简介 慢病毒以及慢病毒载体的应用在实验中越来越广泛。慢病毒之所以被称为慢病毒是因为慢病毒感染患者早期很难观察,大多都会经历一个长达数年的潜伏期,之后会缓慢发病,因此这些病原微生物被称之为慢病毒。现在普遍用的慢病毒载体(lentivirus vector, LV)是由HIV病毒改造而来。二、慢病毒的...
病毒包装的慢病毒
慢病毒(Lentivirus) 载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。特点:1、区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力,常用于感染难转染的细胞,如原代细胞、神经元细胞、干细胞、不分化细胞、心肌细胞、肝细胞、内皮细胞、肿瘤细胞,且效率近100%2、...
实验干货 | 慢病毒(LV)感染MOI预实验手册
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一文读懂慢病毒包装
慢病毒的基础和应用 慢病毒,以其独特的逆转录特性脱颖而出,它是一种双链RNA的逆转录病毒,与普通逆转录病毒不同,它具有广泛的宿主适应性,能感染分裂和非分裂细胞。作为工具载体,重组的慢病毒载体起源于HIV-1,其原有的毒性基因已被剔除,代之以目标基因,形成了无自我复制能力的假型病毒。构建慢...
神经环路示踪中常用的病毒工具有哪些?
通过携带复制相关N蛋白第7个氨基酸突变的重组VSV(VSV-NR7A)和缺失糖蛋白G基因的VSV(VSV-∆G)的开发,克服了这一限制,提高了病毒的顺行跨突触能力。慢病毒(LV)作为逆转录病毒科的成员,是神经科学研究中应用最广泛的载体之一。基于HIV-1的LV载体介导稳定高效的在体基因转移到分化神经元中...
【新手指南】一文让你快速了解神经环路示踪中的病毒工具
慢病毒(LV)是逆转录病毒科的成员,广泛应用于神经科学研究中。LV载体介导稳定高效的在体基因转移到分化神经元,并感染分裂和非分裂细胞。LV载体的选择取决于病毒包膜糖蛋白,而包膜糖蛋白对载体转导至关重要。伪型LV载体的糖蛋白通常来自VSV和RV的包膜糖蛋白(VSV-G;RV-G),可提高顺行跨突触传递...
进行病毒包装时,慢病毒如何进行梯度稀释?
慢病毒体外感染细胞时,可使用完全培养液稀释,血清、双抗或其他营养因子不会影响慢病毒的感染效率。感染操作包括准备细胞、稀释病毒、感染目的细胞、更换培养液,并在第六天检测感染效率。维真生物提供从LV质粒构建至病毒包装的全套服务外包项目,包括LV载体和表达系统用于体内和体外表达human\/mouse\/rat ORFs,...
慢病毒感染技术原理
进行长时间的稳定表达。在研究RNAi方面,慢病毒技术是最为有效的一种解决方案。如您在进行慢病毒感染细胞过程中,效率比较低,可以考虑加入Entrvius-LV感染增强剂,EnvirusTM系列产品不含病毒以及蛋白等其他生物来源成分,不参与病毒和细胞的生理过程。由于EnvirusTM对病毒的吸附和独有的浓缩功能,通过物理作用...