凝固酶阴性葡萄球菌的玻片法试管法

供稿:hz-xin.com     日期:2025-01-18
金黄色葡萄球菌ATCC25923抗beta-lactam 吗?

金黄色葡萄球菌ATCC25923是抗生素敏感试验质控菌株,是否是耐beta-lactam(β内酰胺)需要实验确证

  细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原,在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集,称为直接凝集反应(direct agglutination)。凝集反应中的抗原称为凝集原(agglutinogen),抗全称为凝集素(agglutinin)。常用的凝集试验有玻片法和试管法两种。
  (一)玻片凝集试验
  玻片凝集试验为定性试验方法,一般用已知抗体作为诊断血清、与受检颗粒抗原如菌液或红细胞悬液各加一滴在玻片上,混匀,数分钟后即可用肉眼观察凝集结果,出现颗粒凝集的为阳性反应。
  此法简便、快速,适用于从病人标本中分离得到的菌种的诊断或分型。
  玻片法还用于红细胞ABO血型的鉴定。
  (二)试管凝集试验
  试管凝集试验为半定量试验方法,在微生物学检验中常用已知细菌作为抗原液与一系列稀释的受检血清混合,保温后观察每管内抗原凝集程度,通常以产生明显凝集现象的最高稀释度作为血清中抗体的效价,亦称为滴度。
  在试验中,由于电解质浓度和pH不适当等原因,可引起抗原的非特异性凝集,出现假阳性反应,因此必须设不加抗体的稀释液作对照组。
  临床上常用的直接试管凝集试验为肥达试验(Widal test)和外斐试验(Weil-Felix test)。在输血时也常用于受体和供体两者的红细胞和血清的交互配血试验。

材料 菌株为实验室保存菌株,新鲜未稀释的兔血浆(或人血浆),生理盐水,金黄色葡萄球菌(ATCC25923)与表皮葡萄球菌(ATCC12228)质控菌株。
玻片法:取未稀释的新鲜兔血浆和生理盐水各一滴分别滴于载玻片,取待检菌菌落少许,分别混合,立即观察结果,细菌聚集成团块或无法混匀为阳性,反之阴性,用于测定凝集因子;
试管法:取3支试管,各加0.5ml1:4稀释的新鲜兔血浆,加1~3个菌落入1试管,充分研磨均匀,2、3试管加凝固酶阳性、阴性株作对照,置37℃水浴3~4h,观察结果,细菌是试管内血浆凝固呈胶冻状为阳性,反之为阴性,用于测定游离型凝固酶。
方法评价 公认采用兔血浆较好,许多实验室用病人血浆或血库血浆来代替,因病人血浆中含有各种抗体、药物,尤其某些病人血浆中纤维蛋白含量低下或受各种不同抗凝剂的影响甚至血浆被污染,故一定程度上影响了结果的准确性。采用玻片法检测凝聚因子,有10%~15%金黄色葡萄球菌呈假阴性,因此必须用试管法验证凝聚因子试验。



凝固酶阴性葡萄球菌的玻片法试管法
玻片法:取未稀释的新鲜兔血浆和生理盐水各一滴分别滴于载玻片,取待检菌菌落少许,分别混合,立即观察结果,细菌聚集成团块或无法混匀为阳性,反之阴性,用于测定凝集因子;试管法:取3支试管,各加0.5ml1:4稀释的新鲜兔血浆,加1~3个菌落入1试管,充分研磨均匀,2、3试管加凝固酶阳性、阴性株作...

凝固酶阴性葡萄球菌血浆凝固酶鉴定方法
操作流程是将菌落与血浆分别滴在载玻片上,观察细菌是否聚集成团块,若不能混匀则为阳性,阴性则反之。这种方法主要用于测定凝集因子。试管法则更为精确,它涉及到1:4稀释的新鲜兔血浆,将待检菌落加入,同时加入对照菌株进行比较。在37℃下静置后,如果细菌导致试管内血浆凝固成胶冻状,说明存在游离型凝...

葡萄球菌生化鉴定试剂盒有哪些试验
玻片法中,待试菌落乳化于盐水中,加人血浆后出现凝集者为阳性。试管法则需将兔血浆与培养物混匀,37℃培养观察凝固现象。耐热核酸酶试验涉及24小时肉汤培养物沸水浴处理15分钟后,划线刺种于甲苯胺兰-DNA平板,35℃培养24小时。若刺种线周围出现淡粉色,则为阳性。这一试验用于快速鉴别金黄色葡萄球菌。...

关于检测葡萄球菌凝固酶注意事项的叙述,不正确的是( )。
玻片法是广泛应用于鉴定葡萄球菌致病性的一种试验凝固酶试验,不能用生长于高盐琼脂上的菌落。试管法时,中间葡萄球菌凝集出现时间长于4h;某些菌株的葡激酶在延长孵育时间后可使凝块溶解产生假阴性;若使用的不是无菌血浆可产生假阳性或假阴性结果;受检菌株不纯或污染可导致假阳性。

葡萄球菌的检查有哪些方式???
玻片法将待试菌落乳化于玻片上的盐水中,经10~20S证实无自凝后,用接种环取人或兔血浆一环,与乳化菌液混合,出现凝集者为阳性,另设生理盐水为阴性对照。试管法吸取0.5mL兔血浆与0.5mL金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤24小时培养物充分混匀,置37℃培养,每隔半小时观察一次,连续观察6小时,出现凝固,即将...

凝固酶和凝聚因子试验均阳性的是
它分为玻片法和试管法,玻片法检测的是结合凝固酶(凝聚因子),试管法检测的是游离凝固酶。两种方法均为阳性的是金黄色葡萄球菌。触酶试验可将葡萄球菌属、脑膜炎奈瑟菌与肺炎链球菌相区别,前两者阳性,后者阴性。新生霉素敏感试验是用来区分腐生葡萄球菌与其他葡萄球菌的,前者耐药,后者敏感。

分别是什么?致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶?
游离凝固酶的检测方法通常采用试管法。这两种凝固酶在致病性葡萄球菌的侵袭过程中发挥着不可忽视的作用。结合凝固酶在细菌与宿主之间的“战场”上,为细菌提供了一层保护层,使其在人体内更为稳固地生存和扩散。而游离凝固酶则如同一把尖锐的“利刃”,使得细菌能够更有效地侵入和在体内形成病变。

金黄色葡萄球菌的鉴别要点有哪些
首先,血浆凝固酶试验是关键指标,分为结合型和游离型,可通过玻片法或试管法检测。在玻片法中,菌落与血浆混合,出现凝集为阳性;试管法则观察菌液与兔血浆混合后是否在6小时内凝固。耐热核酸酶试验则对24小时培养物进行处理,若刺种线周围出现淡粉色则为阳性。金黄色葡萄球菌还能发酵甘露醇,这在甘露醇...

葡萄球菌属的致病性与免疫性
游离凝固酶采用试管法检测,结合凝固酶则以玻片法测试。凝固酶耐热,粗制品100℃30分钟或高压灭菌后仍保持部分活性,但易被蛋白分解酶破坏。凝固酶和葡萄球菌的毒力关系密切。凝固酶阳性菌株进入机体后,使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面,阻碍体内吞噬细胞的吞噬,即使被吞噬后,也不易被杀死。...

纤维蛋白降解产物简介
(2)葡萄球菌聚集试验:①玻片法:吸取菌液应用液0.05ml,被检血清0.05ml,在玻片上混匀,室温下将玻片摇动2min,观察细菌有无聚集现象。有聚集者为阳性,无聚集者为阴性。同时以生理盐水0.05ml代替血清作对照。②试管法:取被检血清0.1ml,以生理盐水作倍比稀释,然后在每管中加入新鲜配制的菌...