如何纯化菌种
在平面培养基上初分离出的菌种，经选择后再进行纯化培养以得到质量优良的纯菌种，称作纯化（也叫提纯）。由于受分离方法、培养基质及菌株自身生活力、生长势、发育程度等因素的影响，往往不同菌株的生态特性、品质优劣上有一些变异，因而需要再次纯化培养。菌种的纯化工作同样需在无菌条件下进行，当平面培养基上接种点处刚产生白色菌丝时，立即用接种针选择其中生长势旺盛部分，截取小块，尽量少带培养基，移入PDA斜面培养基试管中央，置25℃恒温了培养，经几次提纯转接，菌种无杂，生长正常，即为纯化的母种。
农谚说得好：“好种长好苗，良种产量高。”栽培食用菌与种植农作物一样，也必须选用高产优质的菌种。实践证明，在相同的栽培条件下，良种可以比一般品种增产三五成，甚至成倍增长。因为优良的菌种生命力强，接种后长速快而旺盛，在培养基内占了优势，从而抑制杂菌生长；同时，由于良种的菌丝在基内分解和吸收养分能力较强，可以更好地为子实体输送养分和水分，获得出耳快、朵形美、肉质厚、产量高的效果。因此，菌种的选取工作，愈来愈引起人们的重视。
菌种的分离和培育，是从事食用菌栽培所必须掌握的基本技术。特别是食用菌生产进入商品化、专业化之后，制种工作显得尤为重要，必须抓好，才能满足大面积栽培的需要。
目前，我国许多栽培黑木耳、银耳的单位和专业户，大都从各地区和科研与生产单位引进试管母种进行扩大培育。外地菌种对本地区的环境条件有一个适应的过程。通过栽培实践，再从本地区的自然条件出发，选择当家品种，自行分离培育，这是保证增产的措施之一。另一方面，菌种长期在试管斜面培养基上传代，也会产生退化现象，使品质降低，以致减产。因此，自行分离培育菌种和保存优良菌种，是生产单位必须掌握的一门技术。
（1）排除细菌或酵母菌污染
在菌种培养中，用肉眼仔细观察培养基表面，不难发现被细菌或酵母菌污染的分离物常出现黏稠状的菌落。取被纯化物接种在无冷凝水、硬度较高（琼脂用量2.3%～2.5%）的斜面上，再降低培养温度至15～20℃，利用某些大型真菌在较低的温度下，菌丝生长速度比细菌蔓延速度快的特点，用尖细的接种针切割菌丝的前端，转接到新的试管斜面培养基中培养，连续2～3次就能获得所要的纯菌丝。也可打破试管，挑取内部长有基内菌丝的琼脂块，移入无冷凝水的培养基上，该法适于被好气性细菌污染的母种。
（2）排除霉菌污染
霉菌和细菌不同，它和食用菌菌丝很相似，也有气生菌丝和基内菌丝。分离的方法主要是抑制杂菌生长，拉大食用菌菌丝生长和杂菌菌丝生长的范围差，从食用菌菌落前端切割，移植入新培养基。杂菌发现越早，分离的成功率越大。严格地说，在斜面培养基上的非接种部位发现的白色菌丝，应认为是杂菌菌落，应马上提纯。若有色孢子已出现，一方面易使分生孢子飘散，另一方面其基内菌丝早已蔓延，可能和食用菌菌丝混生一起。如霉菌刚出现孢子且尚未成熟、变色，则可采用前端菌丝切割法提纯。转管时先将菌丝接种在斜面尖端，当长满斜面后，及时将原接种点连同培养基一起挖掉；如霉菌菌落颜色已深，说明孢子已成熟，稍一振动孢子就会飘满培养基，若再行上法意义不大。如菌丝蔓延范围较大，可将0.2%升汞溶液或1%多菌灵处理过的湿滤纸块覆盖在霉菌的菌落上，可抑制霉菌生长，防止孢子扩散，后用灭菌接种铲将表层铲掉，随之用接种针钩取基内菌丝移入新的培养基，如此2～3次。
（3）限制培养
取直径7～10毫米、高4～6毫米的玻璃环或不锈钢环，经酒精灯火焰灼烧后趁热放到斜面培养基中央，将环的一半嵌入培养基内，然后将染有细菌的接种块放入环内进行培养。细菌生长会被限制在环内，而食用菌菌丝则可越过环而长到环外的培养基上，转管后即可得到纯化。
（4）覆盖培养
在污染了细菌的食用菌菌丝斜面上倾注一层厚约2毫米的培养基，培养一段时间，当食用菌菌丝透过培养基形成新的菌落时，即可切割转管。最好进行二次覆盖。
（5）基质菌丝纯化培养
对棉塞长有霉菌的试管斜面，可将试管打碎，取出培养基，用0.1%升汞浸泡2分钟，用无菌水淋洗，再用无菌滤纸吸干。取一段2厘米的培养基从中部切开，在断面上用无菌刀片切成米粒大小的块，移入新的斜面上进行培养。
（6）药物处理
菌种提纯时，可向培养基中注入选择性强的抗菌制剂，如加入 5～10毫克/升的多菌灵（MBC）、涕必灵（TBZ）或托布津等，可有效地防止菌霉混生；在每毫升培养基中加入30～40毫克链霉素、20～30毫克四环素、金霉素，或50毫克高锰酸钾，可以有效地防止细菌混生；加入灰黄霉素（20单位/毫升），可抑制真菌生长。
（7）破碎菌丝
从试管中取出已污染的培养基，放在0.1%升汞水中处理2分钟，用无菌水冲洗，无菌纸吸干，再放入有玻璃珠的无菌水内，经组织破碎，稀释后注入平板培养，取其单个菌落纯化培养。
本来就是三个菌株！估计是在提纯过程中操作不规范导致，注意超净台的消毒和使用过程中的规范操作，经过三次的话应该可以提纯！
菌体突变最有可能。微生物是很容易变异的。
一般菌种分离纯化和筛选步骤
分离纯化和筛选菌种的过程繁琐且技术要求高，需要专业的实验室设备和严格的实验操作。每一步骤都需要精细的操作和准确的数据记录。分离纯化菌种不仅能够满足科学研究的需求，还能应用于工业生产、环境保护等多个领域。在实际操作中，分离纯化和筛选菌种的技术正在不断发展和完善，新的方法和工具不断涌现，为...
菌种分离纯化目的
分离微生物的主要目标是获取所需的特定菌株，用于工业生产和科学研究。例如，在土壤这一广泛存在的微生物栖息地中，存在着真菌、细菌、放线菌等多种类型的微生物。如果你需要特定的菌种，而市场上又无法购买到，那么就需要在微生物生活的相应环境中进行分离。由于土壤中的微生物种类最为丰富，因此，分离...
高中生物中分离纯化菌种什么方法?
高中生物选择性必修3 （高中教材用的是固体培养基，以下两种方法的第一步都是配置培养基 称取→煮沸→过滤→加琼脂→定容→灭菌→倒平板）一平板划线法 ①灼烧接种环，冷却后蘸取菌液（避免温度过高杀死菌种）②多次划线，每次划线结束，接种环都需要灼烧灭菌（杀死接种环上原有的微生物）③第二次及...
分离纯化菌种有何意义
农谚说得好：“好种长好苗，良种产量高。”栽培食用菌与种植农作物一样，也必须选用高产优质的菌种。实践证明，在相同的栽培条件下，良种可以比一般品种增产三五成，甚至成倍增长。因为优良的菌种生命力强，接种后长速快而旺盛，在培养基内占了优势，从而抑制杂菌生长；同时，由于良种的菌丝在基内分解和...
菌种鉴定方法
菌种鉴定的方法一般有常规鉴定和分子生物学方法：（1）常规鉴定：菌落形态观察、革兰氏染色、菌毛染色、糖类分解实验、吲哚实验、淀粉水解实验、V-P实验、甲基红实验、柠檬酸盐利用实验、硝酸盐还原实验、接触酶实验等 （2）分子生物学方法：细菌16SrDNA菌种鉴定：提取DNA，特定引物PCR扩增，PCR产物纯化测序...
细菌的纯化中试管转接的目的是什么?
细菌的纯化是指从混杂有其他种类微生物（不一定是杂菌）的群体中获得只含有某一种或某一株细菌的过程。一般不进行试管转接，而是只用试管进行混合菌种的稀释。细菌纯化的一般步骤是：混合菌种（液体或固体培养的菌落）→试管稀释→平板涂布→培养→挑取单菌落→菌落培养→获得纯化菌株。进行试管稀释时，是用...
微生物菌种提纯复壮的几个主要方法
1、纯种分离法 通过纯种分离，可将衰退菌种细胞群体中一部分仍保持原有典型性状的单细胞分离出来，经扩大培养，就可恢复原菌株的典型性状。常用的分离纯化的方法可归纳成两类：一类较粗放，只能达到“菌落纯”的水平，即从种的水平来说是纯的。例如采用稀释平板法、涂布平板法、平板划线法等方法获得单...
分离纯化微生物的方法有哪些?各方法适用分离什么菌种?
主要有1.划线法 2.倒平板法 3.涂布法 根据分离的菌种选择不同的培养基 稀释混合倒平板法、稀释涂布平板法、平板划线分离法、稀释摇管法、液体培养基分离法、单细胞分离法、选择培养分离法等。其中前三种方法最为常用,不需要特殊的仪器设备, 分离纯化效果好。从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某...
乳酸菌种的分离纯化方法是?
先将菌种稀释，在固体培养基（培养基的PH偏酸性）上划平板，放入无氧环境下培养
菌种是怎么培育出来的
1. 采样 - 菌种采集通常以土壤为来源，因为土壤是微生物种类丰富的环境之一。此外，植物、腐败物品和某些水域也是采集地点。- 采样时必须使用无菌工具，如无菌铲或无菌棉签，以确保样品不受外界微生物污染。2. 分离与纯化 - 采集的样品需接种到特定培养基上，促进目标菌种生长。- 通过划线分离法、稀释...