如何破坏抗原抗体相互作用
洗脱过程中,可以采用三种主要策略来破坏抗原和抗体之间的相互作用:首先,使用更为极端的条件处理;其次,加入饱和量的小分子化合物以模拟结合位点;最后,采用能够引起构象变化,从而促使抗原释放的试剂。其中,最常用的方法是通过破坏抗体与抗原之间的结合键来实现洗脱。洗脱条件可以设计得较为强烈,导致抗体和抗原变性,也可以设计得较为温和,让抗原和抗体保持其原有活性。
对于多克隆抗体,如果它们是从亲和纯化过程中获得,那么抗原的洗脱条件可以与用于纯化抗体的条件相同。然而,如果情况并非如此,那么洗脱条件只能根据实验经验来确定。通过测试一系列缓冲液,可以建立有效的洗脱条件。
当所用的抗体是针对一种合成肽时,通过加入超过克分子量的合成肽,有时即可将抗原洗脱。当抗原抗体间的相互作用解离时,过量的肽会结合到柱上,从而抑制抗原重新结合,最终实现洗脱。尽管这种方法极具吸引力,包括温和的洗脱条件,但达到有效的洗脱通常会面临挑战。关键在于抗原抗体结合的解离率以及抗体对肽与整个抗原的相对亲和力。在洗脱过程中,最有效的方法是将多肽与抗原抗体柱接触,直到建立新的平衡。借助高亲和力的作用,可以延长反应时间或加入过量的肽。
为了测试洗脱条件,可以将递增量的肽加入至一支小层析柱内。将洗脱缓冲液流速调至尽可能慢,以增加肽与层析柱的接触时间。如果肽本身无法有效洗脱,可将高浓度的肽与不同的洗脱缓冲液相结合,将小量试验得出的洗脱条件再扩大应用于大规模洗脱。
第三种洗脱方法是通过用合适的配体处理抗原抗体柱以引起构象改变,这种方法仅适用于某些特定的蛋白。这些构象改变包括用ATP或小的辅助因子处理抗原而引起的构象变化。识别这些构象改变的抗体,或能够与构象改变而解离的蛋白-蛋白复合物相结合的抗体可以用于制备各种纯的蛋白。这类洗脱方法因抗原不同而异,在此不作详细介绍,但可以提供一种有效的和独特的洗脱方法。
如何破坏抗原抗体相互作用
洗脱过程中,可以采用三种主要策略来破坏抗原和抗体之间的相互作用:首先,使用更为极端的条件处理;其次,加入饱和量的小分子化合物以模拟结合位点;最后,采用能够引起构象变化,从而促使抗原释放的试剂。其中,最常用的方法是通过破坏抗体与抗原之间的结合键来实现洗脱。洗脱条件可以设计得较为强烈,导致抗体...
抗原抗体结合力中作用最弱的是( )。
【答案】:B 范德华力是原子与原子、分子与分子互相接近时发生的一种吸引力。由于抗原与抗体两个不同大分子外层轨道上电子之间相互作用,使得两者电子云中的偶极摆而产生吸引力,促使抗原抗体相互结合,这种引力的能量最弱。2017年临床医学检验技术(师)考试(专业实践能力)真题及详解 ...
影响抗原诱导免疫应答的因素有哪些?
1.化学性质 天然抗原多为大分子有机物。一般蛋白质是良好的抗原。糖蛋白、脂蛋白和多糖类、脂多糖都有免疫原性。脂类和哺乳动物的细胞核成分如DNA、组蛋白一般难以诱导免疫应答。但细胞在某些状态下如肿瘤或过活化时,其染色质、DNA和组蛋白都具有免疫原性,能诱导相应的自身抗体生成。2.分子量大小 ...
抗体-抗原是什么
抗体-抗原的相互作用:当抗原进入人体时,免疫系统会启动反应,产生针对这些抗原的抗体。抗体与抗原之间的相互作用是高度特异性的,即每种抗体只能识别并绑定到特定的抗原上。这种绑定作用会触发一系列的免疫反应,包括吞噬、杀伤或产生其他类型的免疫应答,从而保护人体免受感染或疾病的侵害。总结来说,抗体...
抗体与抗原结合有关的部位是
抗原抗体结合的机制复杂且精确。抗原靶位和抗体决定簇之间的相互作用是通过范德华力、氢键、疏水作用等非共价键实现的。这种结合是高度特异性的,每个抗原靶位通常仅能与一种特定的抗体决定簇结合。这种特异性确保了免疫系统的准确识别和清除外来病原体或异常细胞。结合过程还涉及抗原和抗体之间的构象匹配,...
抗体带什么电荷
在抗原抗体反应过程中,为了提供适当的电解质浓度,通常会使用0.85%的NaCl溶液或各种缓冲液作为抗原和抗体的稀释液。这些稀释液可以有效地维持反应环境中的电解质浓度,促进抗原抗体的相互作用。抗体的电荷状态对于其与抗原的结合至关重要。在不同的pH值条件下,抗体的表面电荷会有所变化,从而影响其与抗原...
抗体和抗原结合是什么
当抗体与抗原结合时,它们通过非共价键相互作用,主要是疏水作用力、氢键和范德华力。这种结合非常特异且牢固,通常需要几个小时到几天的时间来完成。一旦结合发生,抗原-抗体复合物可以通过以下几种方式发挥作用:中和作用:抗体可以直接中和病原体的毒性,例如,中和病毒的感染性或细菌的毒素。激活补体系统...
抗原抗体是什么意思
三、抗原与抗体的相互作用 当抗原进入机体时,机体的免疫系统会识别这些外来物质,并产生相应的抗体来对抗它们。抗原与抗体的结合是高度特异性的,也就是说,特定的抗原只能与特定的抗体结合。这种结合反应可以用于检测病原体的存在,如常见的实验室检测中的血清学反应。四、总结 抗原和抗体是免疫系统中的...
抗体和抗原求详细解释
抗体和抗原的结合完全依靠非共价键的相互作用,这些非共价键的相互作用包括氢键、范德华力、电荷作用和疏水作用。这些相互作用可以发生在侧链或者多肽主干之间。正因这种特异性的结合机制,抗体可以“标记”外来微生物以及受感染的细胞,以诱导其他免疫机制对其进行攻击,又或直接中和其目标,例如通过与入侵和...
抗原 抗体是什么意思?
抗原和抗体的相互作用是通过它们的表面结构来实现的。抗原通常具有较大分子量和复杂形状,表面上有许多表位(抗原决定簇,即AD),这些表位能够被抗体的特异指向所识别。抗体的结构也非常特别,其分子具有两个结合位点,即Fab和Fc。当抗体与抗原结合时,就会形成一个“抗原-抗体复合物”,这个复合物一般会...